Professor Hershel Layton 艾爾夏爾·雷頓教授 (大泉洋): 就職於倫敦Gressenheller大學（虛構的學校）的考古學教授，嗜好紅茶。他是壹位熱心的解密者，以英國紳士自稱。雖然不是偵探，但是沒有他不能解決的神秘事件。
Luke Triton 少年路克·特萊頓 (堀北真希): 自稱是雷頓教授的首位弟子。路克壹直跟在教授左右，並向教授學習。特技是和部分動物交流。
Emmy Altava 蕾米 (相武紗季): 雷頓教授正式的助手，知識豐富，性格強悍，面容姣好。此外在格鬥技和汽車駕駛上頗有造詣。
Jean Descole 迪斯科爾(渡部篤郎): 假面男，天才科學家。通過空頭支票就把大家吸引到自己“解密遊戲”中的反派，讓眾人用生命作為賭註，來爭奪唯壹的“永遠的生命”。此人與雷頓教授似乎有著千絲萬縷的關系。
Inspector Clamp Grosky 格羅斯基警部(大冢芳忠): 蘇格蘭場的警部。正義感很強的熱血男人，卻不擅長推理。似乎生命力很強。
Odlaw Whistler 奧茲羅·維斯拉 (家弓家正): 富有的歌劇作者。類似管風琴的神奇樂器Detragon的發明者兼演奏者。米麗娜之父。
Melina Whistler 米麗娜·維斯拉 (折笠富美子): 奧茲羅的女兒，傑妮斯最好的朋友。1年前去世，但是如今卻以小女孩的模樣復活，並聲稱擁有了“永遠的生命”……
Jenis Quatlane 珍妮絲 (水樹奈奈): 知名歌劇女演員。聲音優美的美女，也是這次事件的委托人。和永遠的歌姬有著某種聯系。本劇主題曲也是由傑妮斯的CV水樹奈奈獻聲。
其他角色
Curtis O'Donne (飯冢昭三): 傳奇般的船長。希望獲得永生來永遠航海。
Mark Broshiv (三宅健太): 業余歷史學家。希望獲得永生來解決所有歷史迷題
Emily Ruth 阿姆莉(豐口惠美): 才色雙絕的高中女生，全英象棋冠軍。希望用永生來救病重的爺爺。
Freddy Bagased 巴格蘭特(中田讓治): 大企業的社長。醫生診斷只剩6個月壽命。希望用永生來逃過死亡。
Annie Doretchi 阿尼·多雷齊(LiLiCo)： 英國著名女作家，希望能永遠地寫小說。
Misha Leidori 雷德利(井上喜久子): 妖艷的模特。希望獲得永生來永遠漂亮，永遠17歲。
Pierre Starbuck 皮耶羅·斯特博古(山寺宏壹) : “傳說的左腳”，因為腿傷而退役的球星。希望獲得永生來重返賽場。