裏面除了女主角愛麗絲（米拉.喬沃維奇）、死而復生的瑞恩·歐卡珀（米歇爾·羅德裏格茲飾）、生化危機4中最後逃出來了的盧瑟·韋斯特（波瑞斯·科喬飾）、在生化危機1裏慘死在激光之下的詹姆斯·席德（科林·薩爾蒙飾）和大反派阿爾伯特·威斯克（肖恩·羅伯茨飾）外還加入了生化危機裏面歷代的角色，有吉爾·瓦倫蒂安（西耶娜·蓋爾利飾） 、裏昂·肯尼迪(喬翰·厄布飾)、克裏斯·雷德菲爾德（文特沃斯·米勒飾）、克萊爾·雷德菲爾德（愛麗·拉特瑞飾） 、艾達·王（李冰冰飾）、卡洛斯·奧利維拉（奧德·菲爾飾）、巴利·波頓（凱文·杜蘭飾）